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pET-N-His-C-His

作者:北京百奥创新科技有限公司 2023-03-01T10:18 (访问量:5573)

      pET-N-His-C-His是一种用于表达N端或C端含有His标签(His tag)的目的蛋白的原核表达质粒,也可以用于表达N端和C端都含有His标签的目的蛋白。本质粒为卡那霉素抗性。
本质粒含有T7启动子/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点的前面和后面,各有一个His标签的编码序列,每个His标签编码6个组氨酸(6X His)。在多克隆位点按照读码框插入目的基因并带上终止密码子,就可以表达仅N端带有His标签的目的蛋白,如果在NdeI和多克隆酶切位点之间按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因,这样就可以表达仅C端带有His标签的目的蛋白,如果在多克隆位点按照读码框插入不带有终止密码子的目的基因,这样就可以表达N端和C端都带有His标签的目的蛋白。

       pET-N-His-C-His质粒的主要信息如下:


Feature NucleotidePosition
f1 origin12-467
Kanamycin resistance ORF563-1645
PBR 322 origin2084
LacI coding sequence3518-4597
T7 promoter4988-5004
His tag coding sequence5079-5096
Multiple cloning site(BamHI-XhoI)5097-5144
His tag coding sequence5145-5162
T7 Terminator5230-5276

pET-N-His-C-His质粒(5301bp)的图谱如下:

pET-N-His-C-His中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-N-His-C-His)包括:

AatIIAcc65IAflIIAgeIAhdIAleIAscI
AvrIIBaeIBbvCIBfuAIBmgBIBmtIBsaI
BseRIBsiWIBspMIBsrGIBsu36ICspCIEagI
Eco53kIFseIKpnIMfeINcoINheINotI
PacIPmeIPmlIPspXIRsrIISacISacII
SbfISexAISfiISnaBISpeISrfIStuI
ZraI

pET-N-His-C-His中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-N-His-C-His once)包括:

DraIIICAC,NNN`GTG242PspOMIG`GGCC,C4035
PsiITTA|TAA370NmeAIIIGCCGAG(N)19,NN`4041
PvuICG,AT`CG943BstEIIG`GTNAC,C4060
AsiSIGCG,AT`CGC943MluIA`CGCG,T4242
TspMIC`CCGG,G1067BstAPIGCAN,NNN`NTGC4563
XmaIC`CCGG,G1067SphIG,CATG`C4771
SmaICCC|GGG1069SgrAICR`CCGG,YG4923
NruITCG|CGA1286SgrAICR`CCGG,YG4923
AcuICTGAAG(N)14,NN`1597XbaIT`CTAG,A5034
AlwNICAG,NNN`CTG1729NdeICA`TA,TG5074
BssSIC`ACGA,G1968BamHIG`GATC,C5097
BstZ17IGTA|TAC2374HindIIIA`AGCT,T5103
Tth111IGACN`N,NGTC2399PstIC,TGCA`G5109
PflFIGACN`N,NGTC2399EcoRIG`AATT,C5115
PpuMIRG`GWC,CY3136EcoRVGAT|ATC5123
FspITGC|GCA3164SalIG`TCGA,C5127
BglIGCCN,NNN`NGGC3182BglIIA`GATC,T5133
PshAIGACNN|NNGTC3401XhoIC`TCGA,G5139
HpaIGTT|AAC3740PaeR7IC`TCGA,G5139
BssHIIG`CGCG,C3831BlpIGC`TNA,GC5218
ApaIG,GGCC`C4035StyIC`CWWG,G5240

pET-N-His-C-His质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
T7 primer (4988-5004): 5′-TAATACGACTCACTATA-3′
pET-R primer (5215-5234): 5′-TGCTAGTTATTGCTCAGCGG-3′
pET-N-His-C-His的全序列信息:D2902 pET-N-His-C-His.txt
包装清单:

产品编号产品名称包装
D2902-1μgpET-N-His-C-His1μg
D2902-100μgpET-N-His-C-His100μg
说明书1份

保存条件:
-20℃保存。
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