口腔/咽拭子DNA提取试剂盒
产品名称： 口腔/咽拭子DNA提取试剂盒
英文名称：
产品编号： D3300
产品价格： 0
产品产地： 北京/中国
品牌商标： 索莱宝
更新时间： null
使用范围： null
北京索莱宝科技有限公司--实验室产品
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口腔/咽拭子DNA提取试剂盒
货号：D3300
规格：50T/ 100T
保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月，2℃-8℃保存时间更长。
试剂盒内容： D1700-50T D1700-100T
RNase A 1ml 1ml×2
蛋白酶K 1ml 1ml×2
溶液A 20ml 40ml
溶液B 20ml 40ml
漂洗液 15ml 15ml×2
洗脱液 15ml 30ml
吸附柱 50 个 100 个
收集管 50 个 100 个
说明书 1 份 1 份
操作步骤：
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入休积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机
在室温下离心。
1、材料处理：
a、取样：使用棉签在面颊内擦拭 10 次。取样前30 分钟内请勿进食或饮水。
b、处理：将拭子转入 2ml 离心管中，用剪刀将棉签部分从其杆上剪下，加入400 l 溶液A。
2、向溶液中加入20ul 的RNase A (10mg/ml)，55℃放置15min。
3、加入20ul 的蛋白酶K( 10mg /ml )，充分颠倒混匀，55℃水浴消化60min，消化期间建议每隔十分钟颠倒离
心管混匀一次。
4、加入400ul 体积溶液B，充分颠倒混匀，如出现白色沉淀，可放置于75℃ 15-30min，沉淀即会消失，不影
响后续实验。
5、将溶液转移至新的离心管，加入400ul 无水乙醇，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响DNA 的提
取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中（混匀后分两次转入同一吸附柱）。
6、12000rpm 离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中（重复两次将上一步骤所得溶液全部转入）。
7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)， 12000rpm离心1min，弃废液，将吸
附柱放入收集管中。
8、向吸附柱中加入600ul 漂洗液，12000rpm 离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
9、12000rpm 离心2min，将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，
否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR 等。
10、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul 经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置
5min，12000rpm 离心2min。
11、可将离心所得洗脱液再加入吸附柱中，12000rpm 离心2min，即可得到高质量的基因组DNA。
注意事项:
1、试剂盒拆封后，RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。
2、如果试剂盒中的溶液出现沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响效果。
3、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul，体积过小会影响回收效率：洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响，若需要
用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)，pH 值低于7.0会降低洗脱效率。
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