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上海沪震实业有限公司
Benzonase核酸酶

Benzonase核酸酶

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产品名称： Benzonase核酸酶

英文名称： Benzonase核酸酶

产品编号： HZ2001

产品价格： 0

产品产地： 中国/上海

品牌商标： 沪震生物

更新时间： 2023-08-17T10:24:20

使用范围： null

上海沪震实业有限公司
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 Benzonase核酸酶

Benzonase核酸酶，是一种核酸内切酶，可将核酸降解成2~5个碱基的5‘单磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（双链，单链，线状，环状）的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性，又被称为“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白样品粘度，去除蛋白样品中核酸的污染，且无蛋白酶活性残留，核酸酶活性达1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同时， 也具有多种其他用途，如：减少了样品处理时间，增加了蛋白产量，离心时时沉淀和上清分离的更彻底，更便于溶液的离心（尤其是超滤）；提高色谱纯化的效率等。
本公司Benzonase核酸酶包括四种，分别为不含任何标签的Benzonase核酸酶（科研级别）、无内毒素Benzonase核酸酶、Strep tagII Benzonase核酸酶（科研级别）和无内毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶，可适应不同下游用途的需求。其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通过Strep Tactin XT Resin高效去除，而无内毒素的两种Benzonase核酸酶，内毒素含量<40EU/mL（按照单位换算量计算为，每1000U中含有的内毒素<0.15EU），可适用于药用级别的研发和生产。另外，核酸酶残留可通过我公司开发的基于 荧光探针的Benzonase核酸酶残留检测试剂盒进行评测，15min即可完成检测，最低可检测到2ng/ml的核酸酶残留。

 

用量推荐
实验类型 电泳蛋白样品制备 非药物蛋白生产 药物蛋白生产 疫苗、病毒生产 细胞药物
推荐产品 Benzonase(科研级) Benzonase(科研级)
Strep-tagII Benzonase(科研级)		 Benzonase(无内毒素级)
Strep-tagII Benzonase(无内毒素级)
细胞数量 1X106个细胞(10mg组织) 1g湿重 （重悬液10mL） 1L 发酵上清液 1L 培养物
最低用量 125U (0.5 µL) 25U/mL(1 µL) 25U/mL(1 µL) 0.1U/mL(0.4 µL) 0.1U/mL(0.4 µL)
推荐用量 500U (2 µL) 250U/mL(10 µL) 250U/mL(10 µL) 25U/mL(100 µL) 5U/mL(20 µL)
作用时间 通常作用时间37℃在15~60min；25℃在30~120min；

单位定义
37℃，pH 8.0反应条件下，在30分钟内使△A260 值降低1.0(相当于完全消化37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。
注意：含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品，对该酶活性有部分抑制作用，使用时需要增加酶的用量。

应用
  • 蛋白提取时去除核酸污染：在重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时，Benzonase核酸酶可有效降低样品粘度，利于下游操作
  • 与细胞或细菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量
  • 减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象
  • 降解核酸，利于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体制备
  • 有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响，改善蛋白质的分离效果，增强2-DE分辨率
  • 疫苗和病毒样品制备中DNA污染的去除

储存
置于-20°C，可保存2年。

实例分析
benzonase核酸酶消化DNA benzonase核酸酶增加2D电泳的分辨率
Fig1. 分别取不同量（0、0.125、0.25、0.5、1、5、10U）的Benzonase核酸酶消化人基因组DNA10min，进行琼脂糖电泳。 Fig2. A为未加Benzonase处理的，B为加Benzonase处理的
样品进行二维电泳。如图所示，Benzonase处理的样品可显
著增加二维电泳的分辨率。
             Benzonase核酸酶降解基因组DNA Benzonase核酸酶降解基因组DNA
Fig3.经RIPA裂解未经Benzonase核酸酶处理的样品，
大量基因组DNA释放出来，呈鼻涕状。		 Fig4.离心后，左管为未加Bezonase核酸酶，有鼻涕状
粘稠物质悬浮在管中，右管为加Bezonase核酸酶，上
清为透明液体。

超强兼容性
全能核酸酶在非常广泛的条件下，都能保持很高的稳定性和消化核酸的活性，这使其能够与多种细胞裂解液，如RIPA，或含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。例如：>100mM的盐酸胍会完全抑制Benzonase活性，1mM的EDTA会部分抑制Benzonase活性，5mM的EDTA会使活性丧失90%，1mM的PMSF则不会抑制核酸酶活性。 浓度<0.4%的Triton® X-100对核酸酶活性几乎无影响，<0.4%的脱氧胆酸钠使核酸酶可保持70%的活性，超过该临界值之后核酸酶活性会急剧降低，1%的浓度会使活性丧失70%；0.05%的SDS对核酸酶活性几乎无影响，而SDS浓度在0.1%-1%之间时，核酸酶在变性后活性会急剧降低，可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿。另外，核酸酶可耐受6M尿素，当尿素达到7M时，核酸酶在变性后活性会急剧降低，亦可通过增加核酸酶的量使活性得到补偿。
条件参数 最适条件 可作用条件范围
Mg2+ 1-2mM 1-10mM
pH 8.0–9.2 6–10
温度 37°C 0–42°C
DTT 0–100mM >100mM
β-Mercaptoethanol 0–100mM >100mM
一价阳离子浓度（如Na+，K+） 0–20mM 0–150mM
PO43- 0–10 mM 0–100mM

Benzonase的去除
对于Strep-tag II标签的Benzonase核酸酶可通过Strep Tactin XT Resin直接 去除，去除率>95%；对于不带标签的Benzonase核酸酶，可通过色谱纯化去除核酸酶，然后可通过检测残留活性或ELISA检测来判断去除是否成功。常见的色谱纯化方式有阳离子交换介质和阴离子交换介质，具体的Benzonase去除条件如下表：
阴离子交换介质 pH 样品和平衡缓冲液 Benzonase核酸酶
TMAE 7.0 50mM Tris/200mM NaCl not bound
TMAE 7.0 50mM Tris/50mM NaCl not bound
TMAE 8.0 50mM Tris/250mM NaCl not bound
TMAE 8.0 >50mM Tris/100mM NaCl not bound
TMAE 9.0 >50mM Tris/200mM NaCl not bound
TMAE 9.0 50mM Tris/100mM NaCl not bound
DEAE 7.0 50mM Tris/200mM NaCl not bound
DEAE 7.0 50mM Tris/50mM NaCl not bound
DEAE 8.0 50mM Tris/250mM NaCl not bound
DEAE 8.0 >50mM Tris/100mM NaCl not bound
DEAE 9.0 >50mM Tris/250mM NaCl not bound
DEAE 9.0 50mM Tris/50mM NaCl not bound
DMAE 8.0 >50mM Tris/250mM NaCl not bound
DMAE 8.0 50mM Tris/50mM NaCl not bound
阳离子交换介质 pH 样品和平衡缓冲液 Benzonase核酸酶
SO3- 6.0 20mM phosphate/100mM NaCl bound
SO3- 6.0 20mM phosphate/200mM NaCl not bound
SO3- 5.0 20mM acetate/200mM NaCl bound
SO3- 5.0 >20mM acetate/700mM NaCl not bound
SO3- 4.0 >20mM acetate/300mM NaCl bound
SO3- 4.0 20mM acetate/800mM NaCl not bound
C00- 6.0 20mM phosphate/0mM NaCl not bound
C00- 5.0 20mM acetate/40mM NaCl bound
C00- 5.0 20mM acetate/100mM NaCl not bound
C00- 4.0 >20mM acetate/150mM NaCl partially bound
C00- 4.0 20mM acetate/400mM NaCl not bound

 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！