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5min极速病毒RNA提取试剂盒

5min极速病毒RNA提取试剂盒

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产品名称: 5min极速病毒RNA提取试剂盒

英文名称: 5min极速病毒RNA提取试剂盒

产品编号: HZ0146

产品价格: 0

产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

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 5min极速病毒RNA提取试剂盒

描述:本试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从病毒液 样本中纯化出高纯度的总 RNA。该试剂盒是目前国际上操作 步骤最少、用时最短的病毒 RNA 提取试剂盒(仅需要 5 分 钟)。应用本试剂盒提取的 RNA 可直接用于反转录、基因克 隆、定量 PCR 检测等多种分子生物学实验。 组分(以下组分全部室温避光保存) 名称 数量 RNA LB1 20 ml RNA BB2 40 ml Washing Buffer(已含乙醇) 55 ml Nuclease Free H2O 10 ml 吸附柱 50 套 1.5mL Nuclease Free 收集管 50 个 注意事项: (1) 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。 (2) RNA LB1 和 RNA BB2 均具有腐蚀性,注意防护。 操作方法 (1)裂解/上柱(1.5ml EP 管中处理) 液体样本:血清、血浆、唾液、痰液、尿液、细胞培养病毒上清液 等液体样本直接吸取 150 μl 到 1.5ml EP 管中,并加入 120 μl RNA LB1,漩涡混合均匀 10 秒。打开 1.5ml EP 管盖,并加入 500 μl RNA BB2 中,漩涡混合均匀 10 秒。倒入吸附柱中,13000 rpm 离心 30 秒,倒掉过柱后的废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。 抗凝全血:直接吸取 150 μl 到 1.5 ml EP 管中,并加入 120 μl RNA LB1,漩涡混合均匀 10 秒。打开 1.5 ml EP 管盖,并加入 500 μl RNA BB2 中,漩涡混合均匀 10 秒。13000 rpm 离心 30 秒后,将上清 液倒入吸附柱中,13000 rpm 离心 30 秒,倒掉过柱后的废液,进 行后续洗涤/洗脱步骤。 固体样本:组织、粪便等样本。取 10~100 mg 固体材料样本,加 入到 300 μl RNA LB1 中(1.5ml EP 管),并加入几粒钢珠(一般 3~4 粒),置于组织研磨仪中,研磨 1 分钟。研磨完毕后,打开管 盖,向匀浆液中加入 750 μl RNA BB2,并 13000 rpm 离心 1 分钟。 打开管盖,用 1 ml 吸头吸取 750 μl 上清液到吸附柱中。13000 rpm 离心 30 秒,倒掉过柱废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。 (2) 洗涤和洗脱 上述裂解/上柱操作完毕后,向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer,13000 rpm 离心 15 秒,并倒掉过柱废液。重复此洗涤步 骤一次。 将吸附柱重新放回离心机,13000 rpm 空离心 1min,将 残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到 1.5 mL Nuclease Free 收集管中,向吸附柱芯中加入 20~50 μl Nuclease Free H2O,室 温放置 1 min,13,000rpm 离心 1min,洗脱液即为提取的病毒 RNA, 冷冻保存。 特别说明: (1)RNA LB1 和 RNA BB2 含有高盐,在样本加入到此溶液后, 病毒会迅速灭活。同时此溶液对皮肤有腐蚀性,务必做好防护,如 接触到皮肤,用大量清水冲洗。 (2)样本处理过程中的吸头等材料可能含有病毒分子,实验完毕 后务必妥善处理,不能随意丢弃。

5min极速病毒RNA提取试剂盒采用独特的裂解液,可快速从含病毒液样本中纯化出高纯度的总RNA。该RNA提取试剂盒是目前国际上操作步骤最少、用时最短的病毒RNA提取试剂盒。应用本试剂盒提取的RNA可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。

优势

  • 用时最短:极强的裂解能力使得样品瞬间裂解,病毒液样品可在5min内完成总RNA的提取。
  • 超高纯度:该试剂盒采用柱式纯化,获取的RNA A260/A280为2.0~2.2,A260/A230为1.9~2.1。
  • 高质量RNA:使用该试剂盒获取的RNA完整性良好。
  • 使用安全:无需酚/氯仿抽提,减少了有毒有害物质。
  • 操作极简化:只需将样品与裂解液A和B混合,经一步挂柱和洗脱即可获得高质量总RNA。

提取流程

5min极速RNA提取试剂盒

组份

名称 数量
RNA LB1 20 ml
RNA BB2 40 ml
Washing Buffer(已含乙醇) 55 ml
Nuclease Free H2O 10 ml
吸附柱 50套
1.5mL Nuclease Free收集管 50个
注意:(1) 本试剂盒中的Washing Buffer中已经加乙醇,无需单独添加。
(2) RNA LB1和RNA BB2均具有腐蚀性,注意防护。

储存

室温保存,可保存2年。

使用方法

1.裂解/上柱(1.5ml EP管中处理)
液体样本:血清、血浆、唾液、痰液、尿液、细胞培养病毒上清液等液体样本直接吸取150 μl到1.5ml EP管中,并加入120 μl RNA LB1,漩涡混合均匀10秒。打开1.5ml EP管盖,并加入500 μl RNA BB2中,漩涡混合均匀10秒。倒入吸附柱中,13000 rpm离心30秒,倒掉过柱后的废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
抗凝全血: 直接吸取150 μl到1.5 ml EP管中,并加入120 μl RNA LB1,漩涡混合均匀10秒。打开1.5 ml EP管盖,并加入500 μl RNA BB2中,漩涡混合均匀10秒。13000 rpm离心30秒后,将上清液倒入吸附柱中,13000 rpm离心30秒,倒掉过柱后的废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
固体样本:组织、粪便等样本。取10~100 mg固体材料样本,加入到300 μl RNA LB1中(1.5ml EP管),并加入几粒钢珠(一般3~4粒),置于组织研磨仪中,研磨1分钟。研磨完毕后,打开管盖,向匀浆液中加入750 μl RNA BB2,并13000 rpm离心1分钟。打开管盖,用1 ml吸头吸取750 μl上清液到吸附柱中。13000 rpm离心30秒,倒掉过柱废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。

2.洗涤和洗脱
上述裂解/上柱操作完毕后,向吸附柱中加入500 μl Washing Buffer,13000 rpm离心15秒,并倒掉过柱废液。重复此洗涤步骤一次。 将吸附柱重新放回离心机,13000 rpm空离心1min,将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到1.5 ml Nuclease Free收集管中,向吸附柱芯中加入20~50 μl Nuclease Free H2O,室温放置1 min,13,000rpm离心1min,洗脱液即为提取的病毒RNA,冷冻保存。

 

 

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