产品信息
 
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
促销价
DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针
40725ES10
10 mg
488.00
464.00
40725ES25
25 mg
988.00
939.00
 
产品描述
 
DiO是一种亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。进入细胞膜后，DiO在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出绿色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的FITC滤光片检测。
DiO通常不会明显影响细胞的生存力，因此被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂（long-term tracer）。除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
 
产品性质
 
同义名（Synonym）
DiOC18(3); DiO perchlorate; 3,3-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate
CAS 号（CAS NO.）
34215-57-1
分子式（Molecular Fomular）
C53H85ClN2O6
分子量（Molecular Weight）
881.72
外观（Appearance）
橘色至红色固体
Ex/Em
484/501 nm
推荐滤光器（Filter）
XF23-Omega, 31001-Chroma
纯度（Purity）
＞97%
溶解性（Solubility）
溶于DMF，DMSO，乙醇
结构式（Structure）
 
 
运输与保存方法
 
冰袋运输。产品-20 ºC干燥避光保存，有效期1年。
 
注意事项
 
1、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2、染色固定的细胞或组织时，通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛固定，使用其它不适当固定液会导致荧光背景较高。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、本产品仅作科研用途！

使用方法
 
1. 染色液制备
1.1、配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～2 mM。
【注】：a、未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，可稳定保存6个月。
b、发现较难溶解时可以适当加热，并用超声处理以促进溶解。
c、必须保证所用溶剂新鲜无水。
1.2、工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5 μM的工作液。
【注】：工作液最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。
2. 悬浮细胞染色
2.1、加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2.2、37℃孵育细胞2～20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以2 min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
2.3、孵育结束，按1000～1500 rpm离心5 min。
2.4、倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
2.5、重复2.3，2.4步骤两次以上。
3. 贴壁细胞的染色
3.1、将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2、从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
3.3、在盖玻片的一角加入100 μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
3.4、37℃孵育细胞 2～20 min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20 min作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
3.5、吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10 min，然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
4.1、DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
4.2、多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005
表1 相关产品性质
产品名称
货号
分子量
Ex/Em
推荐滤光器
DiO
40725ES10
881.7
484/501 nm
XF23-Omega, 31001-Chroma
DiI
40726ES10
933.87
550/567 nm
XF32-Omega, 31002-Chroma